科研-倉鼠β細(xì)胞營養(yǎng)因子（Betatrophin）定量檢測試劑盒
      
 產(chǎn)品品牌：睿信生物
  商品貨號：RX400066Q

  
	
       文獻(xiàn)(0)
      

     
      說明書
      
 
      
	
      


      
    
    


      



      
    
    


      



	
	
      
      
      
        
        
      
  
      
  
  
      
   
    
      
  

      
 


      

	
      
		
		
        		
		  
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                         2800                
                                 
                         2000                
                				
				
				
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      • 產(chǎn)品貨期：現(xiàn)貨
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      •    保存溫度：2-8℃
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       反應(yīng)種屬  倉鼠
       檢測范圍 62.5pg/mL-2000pg/mL 
       
       物理性能 試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無破損漏氣。 
       
       用途 定量檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中倉鼠β細(xì)胞營養(yǎng)因子（Betatrophin）的濃度。 
       
       實(shí)驗(yàn)原理 本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。在預(yù)包被抗倉鼠β細(xì)胞營養(yǎng)因子（Betatrophin）抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中，加入倉鼠β細(xì)胞營養(yǎng)因子（Betatrophin）校準(zhǔn)品和待測樣本，再加入另一株 HRP 標(biāo)記的抗倉鼠β細(xì)胞營養(yǎng)因子（Betatrophin）抗體（酶標(biāo)抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀 450nm波長上測定吸光度（OD 值），吸光度（OD 值）與待測樣品中倉鼠β細(xì)胞營養(yǎng)因子（Betatrophin）的濃度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線，可以計(jì)算出樣本中倉鼠β細(xì)胞營養(yǎng)因子（Betatrophin）的濃度。 
       
       特異性 本試劑盒識別天然和重組倉鼠β細(xì)胞營養(yǎng)因子（Betatrophin），與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。 
       
       重復(fù)性 板內(nèi)變異系數(shù)均<10%，板間變異系數(shù)均<15%。 
       
       回收率 回收率在 85%-115%之間。 
       
       試驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材 1、酶標(biāo)儀（450nm）
      2、精密移液器及一次性吸頭
      3、蒸餾水
      4、洗瓶或者自動洗板機(jī)
      5、37℃水浴鍋或恒溫箱
      6、500ml 量筒 
       
       操作程序 所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
      1、按前面說明書描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
      2、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
      3、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，0 值孔加樣本稀釋液 50μL，空白孔不加，樣本孔加待測樣本 50μL。
      4、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔、0 值孔和樣本孔，加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體 100μL。
      5、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光孵育 60min。
      6、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 20S，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機(jī)，請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡 30s 的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
      7、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱避光孵育 15min。
      8、所有孔加入終止液 50μL，在酶標(biāo)儀 450nm 波長上讀取各孔吸光度（OD 值）。 
       
       注意事項(xiàng) 1：如果試劑盒的組份需要再次使用，請確保上一次使用之后沒有被污染。
      2：酶標(biāo)板單次未使用完，要謹(jǐn)記密封放到 2-8℃保存。 
       
       問題分析 ①問題描述：標(biāo)準(zhǔn)曲線差
      可能原因及相應(yīng)對策：
      1.試劑盒平衡時(shí)間不夠——不低于 2 個(gè)小時(shí)的室溫平衡
      2.吸取及洗滌不充分——充分的吸取及洗滌
      3.移液不精確——檢查和校正移液器
      ②問題描述：精密度低
      可能原因及相應(yīng)對策：
      1.洗滌不充分——按說明書要求充分洗滌和浸泡
      2.混勻不充分和吸取試劑不足——充分混勻和吸取試劑
      3.重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜——使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的封板模
      4.加樣不精確——檢查和校正移液器
      ③問題描述：O.D值低
      可能原因及相應(yīng)對策：
      1.每孔加的試劑量不精確——校正移液器，精確加入試劑
      2.溫育時(shí)間不正確——保證充足的溫育時(shí)間
      3.溫育溫度不正確——試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度
      4.酶標(biāo)記物或底物失效——通過混合酶標(biāo)記物和底物，顏色迅速顯現(xiàn)來檢查
      5.沒有加入終止液——按照說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液
      6.超出讀數(shù)時(shí)間讀數(shù)——在說明書推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù)
      ④問題描述：樣本值
      可能原因及相應(yīng)對策：
      1.不正確的樣本儲存方式——正確儲存樣本，使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
      2.不正確的樣本收集和處理方法——采取正確的樣本收集和處理方法
      3.待測物質(zhì)在樣本中含量低——使用新鮮樣本，重復(fù)實(shí)驗(yàn) 
       
       聲明 該試劑盒僅供研究使用，如將其用于臨床診斷或任何其他用途，我公司將不對因此產(chǎn)生的問題負(fù)責(zé)，亦不承擔(dān)任何法律責(zé)任。 
       
      
					
					
      				
				
      	
			
      
			

			
			 
      
			
      
						
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