ELISA試劑盒方法設(shè)計(jì)的原理根據(jù)是什么？【白細(xì)胞介素elisa試劑盒】

發(fā)布時(shí)間：2021/6/15 8:32:47 閱讀次數(shù)：1901

ELISA試劑盒在的實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種.如雙抗體夾心法間接法競(jìng)爭(zhēng)法雙位點(diǎn)一步法捕獲法測(cè)IgM抗體應(yīng)用親和素和生物素的ELISA.

ELISA試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù).由于抗原抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯y(tǒng)i烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性.

應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本水平.用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色.

ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色.顏色的深淺和樣品呈正相關(guān).用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品的濃度.

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