發(fā)布時間:2021/5/26 8:50:52 閱讀次數(shù):1124
操縱步驟
1. 包被抗原:用包被液將抗原作適當稀釋, 一般為1~10微克/孔,每孔加200微升,37℃溫育1小時后,4℃冰箱放置16~18小時.
2. 洗滌:倒盡板孔中液體,加滿洗滌液,靜放三分鐘,反復三次,最后將反應板顛倒在吸水紙上,使孔中洗滌液流盡.
3. 加封閉液200微升,37℃放置一小時.
4. 洗滌同2.
5. 加被檢血清:用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,,每孔200微升.同時作稀釋液對照.37℃放置2小時.
6. 洗滌同2.
7. 加辣根過氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小時.
8. 洗滌同2.
9. 加底物:鄰苯二胺溶液加200ml,室溫暗處10--15分鐘.
10. 加終止液:每孔50微升.
11. 觀察結(jié)果:用酶聯(lián)免疫檢測儀記錄450nm讀數(shù).
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